مقایسه دو روش رنگ آمیزی غضروف و استخوان بر اساس کاربرد و عدم کاربرد اسید برای مطالعه تکوین اولیه سیم معمولی (Abramis brama)
محورهای موضوعی : مجله پلاسما و نشانگرهای زیستی
محمدرضا صحرائیان
1
(دانش آموخته دکتری، گروه شیلات، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران.)
سهیل Soheil
2
(گروه شیلات، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران)
غلامرضا رفیعی
3
(استاد گروه شیلات، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران.)
آرش زیبایی
4
(دانشیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران.)
محمد مرادی قرخلو
5
(گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه زنجان ، زنجان ، ایران)
کلید واژه: ماهی سیم معمولی, استخوان‌شناسی, توسعه لارو, آلیزارین رد, آلسیان بلو,
چکیده مقاله :
زمینه و اهداف: روش مرسوم برای رنگ‌آمیزی غضروف و استخوان در مهره‌داران استفاده از آلسیان بلو و آلیزارین رد می‌باشد. در پایه ترکیبات محلول آلسیان بلو از اسید استفاده می‌شود که امکان تمایز هرچه بیشتر بافت‌های رنگ شده را فراهم می‌کند. ولی مشکل اینجاست که در صورت استفاده از اسید، بخشی از یون‌های استخوانی حذف شده و نتایج را با خطا مواجه می‌سازد. بنابراین پژوهش حاضر به مقایسه دو دستورالعمل کاربرد و عدم کاربرد اسید برای رنگ‌آمیزی غضروف و استخوان در بچه ماهی درحال تکوین سیم معمولی برای ارایه راهکار در مطالعاتی آتی پرداخت. مواد و روش‌ها: برای رنگ آمیزی از دو روش پایه اسیدی (اسید استیک) و غیر اسیدی بر اساس محلول های آلسیان بلو و آلیزارین رد طی مراحل آبدهی، رنگ آمیزی غضروف و استخوان، خنثی سازی، آبدهی، هضم پروتئین، رنگبری، شستشوی نهایی و آبگیری و شفاف سازی استفاده شد.نتایج و جمع‌بندی: براساس نتایج می‌توان بیان داشت که در مطالعات تکوین اولیه ماهیان استخوانی استفاده از روش رنگ‌آمیزی غضروف و استخوان بر پایه عدم استفاده از اسید مناسب‌تر از روش بر پایه استفاده از اسید می‌باشد چرا که این روش در دوره اولیه تکاملی که بخش‌های مختلف لارو ماهیان در حال شکل‌گیری به درک تسلسل و الگوی تغییرات با دقت بیشتری کمک می‌نماید.
Introduction & Objective: The traditional method for staining cartilage and bone in vertebrates is to use Alcian blue and Alizarin red. Acid is used in the base of the ingredients of Alcian Blue solution, which led to clear distinguishing of the stained skeletal structures as much as possible. But the problem is that if acid is used, some of the bone ions are removed leading to errors in the results. Therefore, the present study aimed to compare two using acid and acid-free protocols for staining cartilage and bone during the early development of Common bream (Abramis brama) to provide a solution in future studies.Material and Methods: For staining, we applied acid-based (acetic acid) and acid-free protocols using Alican blue and Alizarin red during the processing stages of watering, staining of cartilage and bone, neutralization, watering, protein digestion, color removal, and washing and clearing.Results and Discussion: Based on the results, it can be stated that in studies of the early development of bony fishes, the use of cartilage and bone staining method based on the acid-free protocol is more suitable than using acid because this method helps to better understand the sequence and pattern of skeletal ontogeny more accurately during the early development period.
_||_